生化分子细胞技术列表 - 版本历史

张怡佳：/* PCR万世同堂 */

2026-05-08T10:58:01Z

PCR万世同堂

←上一版本		2026年5月8日 (五) 18:58的版本
第76行：		第76行：
	===[[PCR]]万世同堂===		===[[PCR]]万世同堂===
	*一代PCR		*一代PCR
	*二代PCR：实时荧光定量PCR（real-time PCR/qPCR/RT-~~qPCR）~~		*二代PCR：实时荧光定量PCR（real-time PCR/qPCR/RT-qPCR（real-time PCR不等于RT-PCR，前者为实时 PCR，后者为反转录 PCR））
	*三代PCR：数字PCR（dPCR），常用数字微滴PCR（ddPCR），原理是通过结合微流控等技术，将样本中的核酸分子精确地分到芯片上的一个个小液滴当中，使得每个小液滴中没有或只有一个核酸分子。这样每个小液滴单独扩增并检测信号，可以实现核酸分子的绝对定量		*三代PCR：数字PCR（dPCR），常用数字微滴PCR（ddPCR），原理是通过结合微流控等技术，将样本中的核酸分子精确地分到芯片上的一个个小液滴当中，使得每个小液滴中没有或只有一个核酸分子。这样每个小液滴单独扩增并检测信号，可以实现核酸分子的绝对定量
	*特种PCR：		*特种PCR：

Upupa lavandulae：/* PCR万世同堂 */

2026-04-28T00:50:57Z

PCR万世同堂

←上一版本		2026年4月28日 (二) 08:50的版本
第74行：		第74行：
	*转座子标签：转座子插入使得基因突变，在有相关表型改变的个体中寻找转座子，就能找到被突变的基因。		*转座子标签：转座子插入使得基因突变，在有相关表型改变的个体中寻找转座子，就能找到被突变的基因。
	*图位克隆：染色体步移		*图位克隆：染色体步移
	===~~PCR万世同堂~~===		===[[PCR]]万世同堂===
	*一代PCR		*一代PCR
	*二代PCR：实时荧光定量PCR（real-time PCR/qPCR）		*二代PCR：实时荧光定量PCR（real-time PCR/qPCR/RT-qPCR）
	*三代PCR：微滴PCR（dPCR），常用数字微滴PCR（ddPCR），原理是通过结合微流控等技术，将样本中的核酸分子精确地分到芯片上的一个个小液滴当中，使得每个小液滴中没有或只有一个核酸分子。这样每个小液滴单独扩增并检测信号，可以实现核酸分子的绝对定量		*三代PCR：数字PCR（dPCR），常用数字微滴PCR（ddPCR），原理是通过结合微流控等技术，将样本中的核酸分子精确地分到芯片上的一个个小液滴当中，使得每个小液滴中没有或只有一个核酸分子。这样每个小液滴单独扩增并检测信号，可以实现核酸分子的绝对定量
	*特种PCR：		*特种PCR：
	**易错PCR：可以应用于DNA序列的人工进化和SELEX等；		**易错PCR：可以应用于DNA序列的人工进化和SELEX等；
	**原位PCR：即将FISH和PCR结合，在组织内部''in situ'' PCR；		**原位PCR：即将FISH和PCR结合，在组织内部''in situ'' PCR；
	**热启动PCR：目的简要概述为减少非特异性扩增，实现方法诸如发夹引物、琼脂包埋、抗体失活等等；		**热启动PCR：目的简要概述为减少非特异性扩增，实现方法诸如发夹引物、琼脂包埋、抗体失活等等；
	**重叠PCR（overlap ~~PCR）：采用跨模板片段作为引物扩增，运用了第一次的扩增产物作为长引物进行二次扩增；~~		**重叠PCR（overlap PCR）：采用跨模板片段作为引物扩增，运用了第一次的扩增产物作为长引物进行二次扩增，从而实现两条模版合出来一条产物；
			**多重PCR：大家一起PCR，<s>多P</s>；
	**定点诱变PCR：可以大致分成两代：第一代是运用诱变引物在质粒上直接引入点突变，并且在筛选过程中运用了DpnI这一IV型酶，缺点是由于质粒比较大，扩增效率不高，而且筛选过程略微麻烦一点；第二代是运用线性片段和两组引物先分别进行扩增，再运用类似于overlap PCR的方法，利用长引物扩增得到目的片段；		**定点诱变PCR：可以大致分成两代：第一代是运用诱变引物在质粒上直接引入点突变，并且在筛选过程中运用了DpnI这一IV型酶，缺点是由于质粒比较大，扩增效率不高，而且筛选过程略微麻烦一点；第二代是运用线性片段和两组引物先分别进行扩增，再运用类似于overlap PCR的方法，利用长引物扩增得到目的片段；
	**多突变PCR：有DNA洗牌技术和随机启动重组，主要是获得依托答辩一样序列混乱的DNA；		**多突变PCR：有DNA洗牌技术和随机启动重组，主要是获得依托答辩一样序列混乱的DNA；
	**~~不对称PCR：某一向引物比另一向多，扩增产物的量不对等，主要是获取探针和长引物；~~		**不对称PCR：某一向引物比另一向多，扩增产物的量不对等，主要是获取探针和长引物&利于测序；
	**反向PCR：很简单了，其中有一个引伸技术质粒获救；		**反向PCR：很简单了，其中有一个引伸技术质粒获救；
	**反转录PCR：原理简单，引出来了一堆子技术如SMART、RACE、锚定PCR；		**反转录PCR：原理简单，引出来了一堆子技术如SMART、RACE、锚定PCR；
	**巢式PCR：在克隆里面就叫染色体步移了，原理没甚区别，但讲起来费劲，不赘述；		**巢式PCR：在克隆里面就叫染色体步移了，原理没甚区别，但讲起来费劲，不赘述；
	**~~：TAIL~~-~~PCR又称热不对称交错PCR，貌似除了朱玉贤院士的《现代分子生物学》没见谁讲过，有兴趣可参阅，原理复杂，不赘述；其实Yang~~ Sir的分子生物学（第二版）的P564也讲了，不过较为简略，可供参考（Yang Sir的原理上e44-1也有，不过全文字比较抽象，但给了一堆总结，不错）		**TAIL-PCR：又称热不对称交错PCR，貌似除了朱玉贤院士的《现代分子生物学》没见谁讲过，有兴趣可参阅，原理复杂，不赘述；其实Yang Sir的分子生物学（第二版）的P564也讲了，不过较为简略，可供参考（Yang Sir的原理上e44-1也有，不过全文字比较抽象，但给了一堆总结，不错）
	后人注：其实是TAIL-PCR运用了巢式PCR的原理来实现染色体步移		后人注：其实是TAIL-PCR运用了巢式PCR的原理来实现染色体步移
	**cDNA差异分析：类似于运用PCR对两个不同样本的基因表达多少进行粗略比较，一个样本加引物的接头，一个不加，混合样本后进行扩增，线性扩增则量一致，指数则前大于后，扩增缓慢则后大于前，当然定量精确度差，应用实例较少。		**cDNA差异分析：类似于运用PCR对两个不同样本的基因表达多少进行粗略比较，一个样本加引物的接头，一个不加，混合样本后进行扩增，线性扩增则量一致，指数则前大于后，扩增缓慢则后大于前，当然定量精确度差，应用实例较少。
第98行：		第99行：
	**多态PCR		**多态PCR
	**桥式PCR		**桥式PCR
			**<s>GPCR：单位膜上的PCR</s>
	===基因工程(genetic engineering)===		===基因工程(genetic engineering)===
	*捕获		*捕获

2026年4月9日 (四) 05:21 一万山石

2026-04-09T05:21:52Z

←上一版本		2026年4月9日 (四) 13:21的版本
第89行：		第89行：
	**反转录PCR：原理简单，引出来了一堆子技术如SMART、RACE、锚定PCR；		**反转录PCR：原理简单，引出来了一堆子技术如SMART、RACE、锚定PCR；
	**巢式PCR：在克隆里面就叫染色体步移了，原理没甚区别，但讲起来费劲，不赘述；		**巢式PCR：在克隆里面就叫染色体步移了，原理没甚区别，但讲起来费劲，不赘述；
	**~~TAIL~~-~~PCR：又称热不对称交错PCR，貌似除了朱玉贤院士的《现代分子生物学》没见谁讲过，有兴趣可参阅，原理复杂，不赘述；其实Yang~~ Sir的分子生物学（第二版）的P564也讲了，不过较为简略，可供参考（Yang Sir的原理上e44-1也有，不过全文字比较抽象，但给了一堆总结，不错）		**：TAIL-PCR又称热不对称交错PCR，貌似除了朱玉贤院士的《现代分子生物学》没见谁讲过，有兴趣可参阅，原理复杂，不赘述；其实Yang Sir的分子生物学（第二版）的P564也讲了，不过较为简略，可供参考（Yang Sir的原理上e44-1也有，不过全文字比较抽象，但给了一堆总结，不错）
			后人注：其实是TAIL-PCR运用了巢式PCR的原理来实现染色体步移
	**cDNA差异分析：类似于运用PCR对两个不同样本的基因表达多少进行粗略比较，一个样本加引物的接头，一个不加，混合样本后进行扩增，线性扩增则量一致，指数则前大于后，扩增缓慢则后大于前，当然定量精确度差，应用实例较少。		**cDNA差异分析：类似于运用PCR对两个不同样本的基因表达多少进行粗略比较，一个样本加引物的接头，一个不加，混合样本后进行扩增，线性扩增则量一致，指数则前大于后，扩增缓慢则后大于前，当然定量精确度差，应用实例较少。
	**接头连接PCR：属于单侧PCR技术，通过将人工合成的特定接头连接到基因组DNA酶切片段末端，结合已知序列的特异性引物和接头通用引物，实现已知序列的侧翼未知区域的定向扩增。		**接头连接PCR：属于单侧PCR技术，通过将人工合成的特定接头连接到基因组DNA酶切片段末端，结合已知序列的特异性引物和接头通用引物，实现已知序列的侧翼未知区域的定向扩增。

临时小号：/* 蛋白质-蛋白质互作 */

2026-02-04T05:52:11Z

蛋白质-蛋白质互作

←上一版本		2026年2月4日 (三) 13:52的版本
第25行：		第25行：
	*ITC等温滴定量热法		*ITC等温滴定量热法
	*BLI生物膜层干涉		*BLI生物膜层干涉
			*MST微量热泳动
	===[[荧光相关技术]]===		===[[荧光相关技术]]===
	*FRAP		*FRAP

临时小号：想到啥写啥

2026-02-03T23:59:52Z

想到啥写啥

←上一版本		2026年2月4日 (三) 07:59的版本
第24行：		第24行：
	*SPR表面等离子共振		*SPR表面等离子共振
	*ITC等温滴定量热法		*ITC等温滴定量热法
			*BLI生物膜层干涉
	===[[荧光相关技术]]===		===[[荧光相关技术]]===
	*FRAP		*FRAP
第49行：		第50行：
	*northwestern blotting：RNA探针检测蛋白质电泳结果		*northwestern blotting：RNA探针检测蛋白质电泳结果
	*middle eastern：DNA检测RNA		*middle eastern：DNA检测RNA
	*far ~~western：检测脂质~~		*far western：检测脂质翻译后修饰
			*Eastern-Western：脂质与蛋白互作
			*EMSA(本质上属同一个原理)
	===层析/色谱技术===		===层析/色谱技术===
	*凝胶过滤层析		*凝胶过滤层析
第55行：		第58行：
	**IMAC		**IMAC
	*聚焦层析：固定相上有缓冲剂，酸性的层析液流过，从上到下被缓冲，形成ph梯度；蛋白质会在进入等电点以上的pH后吸附在层析柱上；随着层析液不断流入，层析柱缓冲能力被逐渐耗竭，pH梯度移动(原来某一pH的位置下移)，不同的蛋白就随等电点相应的梯度流出。		*聚焦层析：固定相上有缓冲剂，酸性的层析液流过，从上到下被缓冲，形成ph梯度；蛋白质会在进入等电点以上的pH后吸附在层析柱上；随着层析液不断流入，层析柱缓冲能力被逐渐耗竭，pH梯度移动(原来某一pH的位置下移)，不同的蛋白就随等电点相应的梯度流出。
			*薄层层析
	*离子交换层析		*离子交换层析
	*疏水层析		*疏水层析
	*~~反向层析~~		*反相层析
			*柱前衍生反相液相层析
	===克隆某特定基因的办法===		===克隆某特定基因的办法===
	*功能克隆：已知基因产物(蛋白质)，获得编码序列		*功能克隆：已知基因产物(蛋白质)，获得编码序列
第119行：		第124行：
	*clear native page		*clear native page
	*quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）		*quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）
			*SDS-VAGE(垂直的琼脂糖凝胶电泳)预制胶

	=== 单细胞转录组学 ===		=== 单细胞转录组学 ===

Riby栗：/* 基因工程(genetic engineering) */

2025-10-06T11:45:28Z

基因工程(genetic engineering)

←上一版本		2025年10月6日 (一) 19:45的版本
第86行：		第86行：
	**cDNA差异分析：类似于运用PCR对两个不同样本的基因表达多少进行粗略比较，一个样本加引物的接头，一个不加，混合样本后进行扩增，线性扩增则量一致，指数则前大于后，扩增缓慢则后大于前，当然定量精确度差，应用实例较少。		**cDNA差异分析：类似于运用PCR对两个不同样本的基因表达多少进行粗略比较，一个样本加引物的接头，一个不加，混合样本后进行扩增，线性扩增则量一致，指数则前大于后，扩增缓慢则后大于前，当然定量精确度差，应用实例较少。
	**接头连接PCR：属于单侧PCR技术，通过将人工合成的特定接头连接到基因组DNA酶切片段末端，结合已知序列的特异性引物和接头通用引物，实现已知序列的侧翼未知区域的定向扩增。		**接头连接PCR：属于单侧PCR技术，通过将人工合成的特定接头连接到基因组DNA酶切片段末端，结合已知序列的特异性引物和接头通用引物，实现已知序列的侧翼未知区域的定向扩增。
			**锅柄PCR
			**锚定PCR
			**等温PCR
			**多态PCR
			**桥式PCR
	===基因工程(genetic engineering)===		===基因工程(genetic engineering)===
			*捕获
			**启动子捕获
			**外显子捕获
			**增强子捕获
	*基因打靶		*基因打靶
	**胸苷激酶和新霉素抗性		**胸苷激酶和新霉素抗性
	**条件性敲除：Cre-~~loxP、Flp~~-FRT		**条件性敲除：Cre-loxP、Dre-rox、Flp-FRT
	*基因编辑		*基因编辑
	**巨核酸酶		**巨核酸酶
第98行：		第107行：
	***dCas9		***dCas9
	***Cas9n		***Cas9n
			***CRISPRa
			***CRISPRi
			***SHERLOCK
			***DETECTOR
			***NASBA-CRISPR
	===电泳===		===电泳===
	*[[脉冲场凝胶电泳]]		*[[脉冲场凝胶电泳]]
第110行：		第124行：
	* SMART-seq		* SMART-seq
	* CEL-seq		* CEL-seq
			* DROP-seq

	=== 空间转录组学 ===		=== 空间转录组学 ===

YYX：/* 蛋白质-DNA互作 */

2025-10-02T14:01:44Z

蛋白质-DNA互作

←上一版本		2025年10月2日 (四) 22:01的版本
第14行：		第14行：
	* Y1H		* Y1H
	* Chip-seq		* Chip-seq
			* EMSA

	===蛋白质-蛋白质互作===		===蛋白质-蛋白质互作===

YYX：/* 蛋白质-DNA互作 */

2025-10-02T13:12:01Z

蛋白质-DNA互作

←上一版本		2025年10月2日 (四) 21:12的版本
第13行：		第13行：
	* cut&tag		* cut&tag
	* Y1H		* Y1H
			* Chip-seq

	===蛋白质-蛋白质互作===		===蛋白质-蛋白质互作===
第104行：		第105行：
	*quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）		*quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）

			=== 单细胞转录组学 ===

			* SMART-seq
			* CEL-seq

			=== 空间转录组学 ===

			* merfish（只能检测特定转录本，但是可精准到亚细胞定位）
			* visium（空间转录组学，需1-10细胞）
	{{学科分类}}		{{学科分类}}

	[[Category:生物技术]]		[[Category:生物技术]]

YYX：/* 染色质构象捕获 */

2025-10-02T13:02:23Z

染色质构象捕获

←上一版本		2025年10月2日 (四) 21:02的版本
第8行：		第8行：
	*ChIP-loop		*ChIP-loop
	*ChIA-PET		*ChIA-PET

			=== 蛋白质-DNA互作 ===

			* cut&tag
			* Y1H

	===蛋白质-蛋白质互作===		===蛋白质-蛋白质互作===
	*Y2H酵母双杂交		*Y2H酵母双杂交

Sofia：自动添加 Sofia 模板和分类

2025-08-23T08:27:48Z

自动添加 Sofia 模板和分类

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第97行：		第97行：
	*clear native page		*clear native page
	*quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）		*quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）

			{{学科分类}}

			[[Category:生物技术]]

生化分子细胞技术列表 - 版本历史

张怡佳：​/* PCR万世同堂 */

Upupa lavandulae：​/* PCR万世同堂 */

2026年4月9日 (四) 05:21 一万山石

临时小号：​/* 蛋白质-蛋白质互作 */

临时小号：​想到啥写啥

Riby栗：​/* 基因工程(genetic engineering) */

YYX：​/* 蛋白质-DNA互作 */

YYX：​/* 蛋白质-DNA互作 */

YYX：​/* 染色质构象捕获 */

Sofia：​自动添加 Sofia 模板和分类

张怡佳：/* PCR万世同堂 */

Upupa lavandulae：/* PCR万世同堂 */

临时小号：/* 蛋白质-蛋白质互作 */

临时小号：想到啥写啥

Riby栗：/* 基因工程(genetic engineering) */

YYX：/* 蛋白质-DNA互作 */

YYX：/* 蛋白质-DNA互作 */

YYX：/* 染色质构象捕获 */

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