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MRNA的逆转录 - 版本历史
2026-05-14T15:41:18Z
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野狼君卡共和：创建页面，内容为“=== 步骤 === 1、在冰浴中的PCR管中加入如下混合物 {| class="wikitable" |+ |总RNA |3μL |- |Oligo dT引物 |1μL |- |RNase free H<sub>2</sub>O |7μL |} 2、轻轻混匀3~5s后，65℃水浴5min<sub>（使RNA二级结构打开）</sub>，冰浴30s，离心5s 3、加入以下组分 {| class="wikitable" |+ |5× Reaction buffer |4μL |- |RNase inhibitor（拮抗剂/抑制剂） |1μL |- |dNTP |2μL |- |AMV RT |2μL |} 4、轻轻混匀5s 5、PCR仪…”
2025-06-13T11:22:23Z
<p>创建页面，内容为“=== 步骤 === 1、在冰浴中的PCR管中加入如下混合物 {| class="wikitable" |+ |总RNA |3μL |- |Oligo dT引物 |1μL |- |RNase free H<sub>2</sub>O |7μL |} 2、轻轻混匀3~5s后，65℃水浴5min<sub>（使RNA二级结构打开）</sub>，冰浴30s，离心5s 3、加入以下组分 {| class="wikitable" |+ |5× Reaction buffer |4μL |- |RNase inhibitor（拮抗剂/抑制剂） |1μL |- |dNTP |2μL |- |AMV RT |2μL |} 4、轻轻混匀5s 5、PCR仪…”</p>
<p><b>新页面</b></p><div>=== 步骤 ===<br />
1、在冰浴中的PCR管中加入如下混合物<br />
{| class="wikitable"<br />
|+<br />
|总RNA<br />
|3μL<br />
|-<br />
|Oligo dT引物<br />
|1μL<br />
|-<br />
|RNase free H<sub>2</sub>O<br />
|7μL<br />
|}<br />
2、轻轻混匀3~5s后，65℃水浴5min<sub>（使RNA二级结构打开）</sub>，冰浴30s，离心5s<br />
<br />
3、加入以下组分<br />
{| class="wikitable"<br />
|+<br />
|5× Reaction buffer<br />
|4μL<br />
|-<br />
|RNase inhibitor（拮抗剂/抑制剂）<br />
|1μL<br />
|-<br />
|dNTP<br />
|2μL<br />
|-<br />
|AMV RT<br />
|2μL<br />
|}<br />
4、轻轻混匀5s<br />
<br />
5、PCR仪上按下列条件进行反转录反应<br />
{| class="wikitable"<br />
|+<br />
|cDNA合成<br />
|42℃<br />
|60min<br />
|-<br />
|终止反应<br />
|85℃<br />
|5min（酶失活）<br />
|}</div>
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