查看“︁生化分子细胞技术列表”︁的源代码

*[[常见分子克隆元件功能]]
*[[NET-seq]]
===[[染色质构象捕获]]===
*3C
*4C
*5C
*Hi-C
*ChIP-loop
*ChIA-PET

=== 蛋白质-DNA互作 ===

* cut&tag
* Y1H
* Chip-seq
* EMSA

===蛋白质-蛋白质互作===
*Y2H酵母双杂交
*CoIP免疫共沉淀
*pull down下拉实验
*FERT荧光共振能量转移
*BiFC双分子荧光互补
*SPR表面等离子共振
*ITC等温滴定量热法
*BLI生物膜层干涉
*MST微量热泳动
===[[荧光相关技术]]===
*FRAP
*FLIP
*FLAP
*FRET
*FLIM
===蛋白质-RNA互作===
*RIP-RNA结合蛋白免疫共沉淀：甲醛交联，裂解细胞，抗体沉淀特定蛋白，去交联获得RNA。
*RNA pull down：标记的诱饵RNA与细胞裂解物孵育；检测与诱饵RNA结合的蛋白。也可以已知蛋白找核酸。
*MeRIP-RNA甲基化免疫沉淀：用甲基化RNA特异抗体沉淀并检测结合蛋白
===[[染色质开放性检测技术|染色质开放性检测]]===
*[[染色质开放性检测技术|MNase-seq]]
*[[染色质开放性检测技术|FAIRE-seq]]
*[[染色质开放性检测技术|DNase-seq]]
*[[染色质开放性检测技术|ATAC-seq]]
===各种印记===
*western blotting：蛋白质，但也可以检测翻译后修饰。
*northern blotting：检测RNA，探针是什么无所谓。
*southern blotting：检测DNA，探针无所谓。
*eastern blotting：二维电泳蛋白质，检测修饰，用的较少。
*dot blotting ：不经电泳
*Southwestern blotting：DNA探针检测蛋白质电泳结果
*Far-western blotting：不用抗体而用可能互作的蛋白
*northwestern blotting：RNA探针检测蛋白质电泳结果
*middle eastern：DNA检测RNA
*far western：检测脂质翻译后修饰
*Eastern-Western：脂质与蛋白互作
*EMSA(本质上属同一个原理)
===层析/色谱技术===
*凝胶过滤层析
*亲和层析
**IMAC
*聚焦层析：固定相上有缓冲剂，酸性的层析液流过，从上到下被缓冲，形成ph梯度；蛋白质会在进入等电点以上的pH后吸附在层析柱上；随着层析液不断流入，层析柱缓冲能力被逐渐耗竭，pH梯度移动(原来某一pH的位置下移)，不同的蛋白就随等电点相应的梯度流出。
*薄层层析
*离子交换层析
*疏水层析
*反相层析
*柱前衍生反相液相层析
===克隆某特定基因的办法===
*功能克隆：已知基因产物(蛋白质)，获得编码序列
*定位克隆：已知基因位置，染色体步移
*序列克隆：已知基因部分序列，获得全部序列
*表型克隆：
===基因克隆的具体技术===
*鸟枪克隆法：将基因组打成片段，转入受体，寻找相关表型变化
*消减杂交：将两份cDNA混合，去除双链，剩余的可能是与表型差异有关的序列。
*转座子标签：转座子插入使得基因突变，在有相关表型改变的个体中寻找转座子，就能找到被突变的基因。
*图位克隆：染色体步移
===[[PCR]]万世同堂===
*一代PCR
*二代PCR：实时荧光定量PCR（real-time PCR/qPCR/RT-qPCR（real-time PCR不等于RT-PCR，前者为实时 PCR，后者为反转录 PCR））
*三代PCR：数字PCR（dPCR），常用数字微滴PCR（ddPCR），原理是通过结合微流控等技术，将样本中的核酸分子精确地分到芯片上的一个个小液滴当中，使得每个小液滴中没有或只有一个核酸分子。这样每个小液滴单独扩增并检测信号，可以实现核酸分子的绝对定量
*特种PCR：
**易错PCR：可以应用于DNA序列的人工进化和SELEX等；
**原位PCR：即将FISH和PCR结合，在组织内部''in situ'' PCR；
**热启动PCR：目的简要概述为减少非特异性扩增，实现方法诸如发夹引物、琼脂包埋、抗体失活等等；
**重叠PCR（overlap PCR）：采用跨模板片段作为引物扩增，运用了第一次的扩增产物作为长引物进行二次扩增，从而实现两条模版合出来一条产物；
**多重PCR：大家一起PCR，<s>多P</s>；
**定点诱变PCR：可以大致分成两代：第一代是运用诱变引物在质粒上直接引入点突变，并且在筛选过程中运用了DpnI这一IV型酶，缺点是由于质粒比较大，扩增效率不高，而且筛选过程略微麻烦一点；第二代是运用线性片段和两组引物先分别进行扩增，再运用类似于overlap PCR的方法，利用长引物扩增得到目的片段；
**多突变PCR：有DNA洗牌技术和随机启动重组，主要是获得依托答辩一样序列混乱的DNA；
**不对称PCR：某一向引物比另一向多，扩增产物的量不对等，主要是获取探针和长引物&利于测序；
**反向PCR：很简单了，其中有一个引伸技术质粒获救；
**反转录PCR：原理简单，引出来了一堆子技术如SMART、RACE、锚定PCR；
**巢式PCR：在克隆里面就叫染色体步移了，原理没甚区别，但讲起来费劲，不赘述；
**TAIL-PCR：又称热不对称交错PCR，貌似除了朱玉贤院士的《现代分子生物学》没见谁讲过，有兴趣可参阅，原理复杂，不赘述；其实Yang Sir的分子生物学（第二版）的P564也讲了，不过较为简略，可供参考（Yang Sir的原理上e44-1也有，不过全文字比较抽象，但给了一堆总结，不错）
  后人注：其实是TAIL-PCR运用了巢式PCR的原理来实现染色体步移
**cDNA差异分析：类似于运用PCR对两个不同样本的基因表达多少进行粗略比较，一个样本加引物的接头，一个不加，混合样本后进行扩增，线性扩增则量一致，指数则前大于后，扩增缓慢则后大于前，当然定量精确度差，应用实例较少。
**接头连接PCR：属于单侧PCR技术，通过将人工合成的特定接头连接到基因组DNA酶切片段末端，结合已知序列的特异性引物和接头通用引物，实现已知序列的侧翼未知区域的定向扩增。
**锅柄PCR
**锚定PCR
**等温PCR
**多态PCR
**桥式PCR
**<s>GPCR：单位膜上的PCR</s>
===基因工程(genetic engineering)===
*捕获
**启动子捕获
**外显子捕获
**增强子捕获
*基因打靶
**胸苷激酶和新霉素抗性
**条件性敲除：Cre-loxP、Dre-rox、Flp-FRT
*基因编辑
**巨核酸酶
**ZFN锌指核酸酶
**TALEN类转录活化因子核酸酶
**[[CRISPER-Cas9及相关|CRISPR-Cas9及相关]]
***prime-editing引物编辑
***dCas9
***Cas9n
***CRISPRa
***CRISPRi
***SHERLOCK
***DETECTOR
***NASBA-CRISPR
===电泳===
*[[脉冲场凝胶电泳]]
*二维琼脂糖凝胶电泳
*非变性电泳native page
*blue native page
*clear native page
*quantitative preparative native continuous（QPNC-PAGE）
*SDS-VAGE(垂直的琼脂糖凝胶电泳)预制胶

=== 单细胞转录组学 ===

* SMART-seq
* CEL-seq
* DROP-seq

=== 空间转录组学 ===

* merfish（只能检测特定转录本，但是可精准到亚细胞定位）
* visium（空间转录组学，需1-10细胞）
{{学科分类}}

[[Category:生物技术]]