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本页面主要总结生化中常见的颜色反应。 == 糖类相关颜色反应 == === Bial 试验 === [[文件:Bial实验.png|缩略图|bial实验]] [[文件:Bial实验2.png|缩略图|bial实验]] 苔黑酚(甲基间苯二酚/地衣酚)、浓盐酸、氯化铁。用于鉴定戊糖。 戊糖会脱水形成糠醛,再产生蓝色或绿色的产物。 己糖可能会产生浑浊棕色、黄色或灰色的溶液,很容易与戊糖的绿色区分开来。 bial实验似乎不能区分DNA和RNA。 [[文件:二苯胺.png|缩略图|二苯胺]] === Dische 测试 === 二苯胺、冰醋酸、硫酸和乙醇。 加热时,DNA会产生蓝色,但RNA不产生反应。 === Seliwanoff 检验 === 间苯二酚和浓盐酸。 [[文件:Seliwanoff实验.png|缩略图|seliwanoff实验]] 醛糖会产生淡红色,而酮糖迅速产生鲜红色。 蔗糖也会产生鲜红色。 === Molisch检验 === 糖与α-萘酚乙醇溶液混合,向其上方加入一层浓硫酸,交界处产生红色环。 用于鉴定是否无糖(不只有糖会反应)的存在。 === '''蒽酮检验''' === 与Molisch检验原理类似,使用蒽酮和浓硫酸,在620nm有最大光吸收,可用于总糖定量。 === Fehling试剂&Benedict试剂 === 斐林试剂:酒石酸钾钠、氢氧化钠、硫酸铜。 本尼迪特试剂:碳酸钠、柠檬酸钠、硫酸铜。 水浴加热,还原糖可以产生砖红色沉淀。 * Barfoed实验:乙酸铜和乙酸,煮沸 === Tollens'试剂 === 即银氨溶液。 * Tollens’试剂有时指间苯三酚鉴定戊糖,这个检测方法与银氨溶液是同一个人发现的。 == 氨基酸相关颜色反应 == === 米伦反应 === 米伦反应(Millon reaction)被用作检测蛋白质,但实质是酪氨酸参与反应。 试剂中含有亚硝酸与硝酸,以及Hg(Ⅱ)和Hg(Ⅲ)离子,主要的显色反应是汞离子的配合过程。 [[文件:米伦反应.png|无框|384x384像素]] 可以看到被硝化后提供了配位反应的基团,因此产生颜色。 ==== '''<big>坂口反应</big>''' ==== 坂口反应(Sakaguchi reaction),精氨酸的分析与测定。 胍基与α-萘酚在碱性NaBrO中发生反应,生成红色产物。 === Hopkins-Cole反应 === 这个又叫乙醛酸反应(Glyoxylate reaction),反应过程涉及次溴酸根。 ==== '''<big>茚三酮反应</big>''' ==== 茚三酮反应(ninhydrin reaction),首先氨基酸被茚三酮氧化分解为醛、氨、CO<sub>2</sub>,弱酸下还原性茚三酮与氨和另一分子茚三酮缩合成蓝紫色物质,在570nm有吸收峰。 其中脯氨酸与羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色物质。 === 与亚硝酸反应 === == 蛋白质相关颜色反应 == ==== '''<big>考马斯亮蓝法(Bradford反应)</big>''' ==== 考马斯亮蓝:游离态呈红色(吸收峰为488nm),利用芳香环与与蛋白质疏水区结合后呈亮蓝色(吸收峰为595nm)。 [[文件:考马斯亮蓝.png|缩略图]] 优点:反应灵敏,试剂简单,速率快,且不易被干扰。 缺点:线性关系不是很好。 有两种型号的考马斯亮蓝:R250和G250。 R250:可以被洗脱,可用于电泳条带染色。 G250:较R250多俩甲基,所以疏水性更强一些,结合迅速,常用于定量。 === 双缩脲法 === === 福林酚法(Lowry法) ===
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