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用户:野狼君卡共和/实验笔记本
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=== 第一模块 === ==== <big>一、细胞学实验</big> ==== '''''一、PAS反应(高碘酸-Schiff反应)''''' '''实验原理:'''高碘酸将多糖中的C-C键打断,生成乙二醇,并氧化为乙二醛;乙二醛与希夫试剂(无色品红)反应,产生紫红色。 '''实验材料:'''小鼠肝脏组织,酒精,水,二甲苯,高碘酸,希夫试剂,亚硫酸水 '''石蜡切片过程:'''肝脏组织块——固定(维持其状态,4%甲醛/10%福尔马林)——梯度酒精脱水(70%-80%-90%-95%-无水乙醇)——透明(二甲苯)——浸蜡——包埋成蜡块——切片(石蜡切片机,2~4μm)——展片-捞片-烤干——///脱蜡(二甲苯)——梯度酒精复水(100%-95%-75%-纯水)——染色(PAS试剂)——梯度酒精脱水——封片(含有二甲苯的中性树胶)——晾片(2~3天)——永久切片 '''实验步骤(上述'///'后):''' 1、从烤箱中取出切片,'''趁热'''(石蜡成液态,效率高)放入二甲苯中,'''静置10min。''' 2、用'''铅笔'''写名字'''(***区分正反)''',依次投入无水乙醇('''3min''')、95%乙醇('''3min''')、75%乙醇('''3min''')、清水('''1min''') 3、用吸水纸将组织周围的水轻轻擦干;用滴管向组织上滴加'''高碘酸(完全没过组织)''','''氧化10min''' 4、将切片投入'''75%乙醇片刻'''(洗净高碘酸),吸干 5、滴加'''希夫试剂''',避光静置'''15~30min''' 6、向组织上滴加'''亚硫酸水''',漂洗('''1次30秒,漂洗2~3次''') 7、梯度酒精脱水:75%乙醇('''2min''')、95%乙醇('''2min''')、无水乙醇('''2min'''),然后充分晾干 8、封片 PS:偏重亚硫酸钠+酸+碱性品红生成无色品红,再加入活性炭震荡,过滤,即可生成遇醛变红的希夫试剂。 '''捎带一些理论知识:''' '''肝动脉与肝门静脉汇合通入肝静脉;肝内胆管收集肝细胞分泌的胆汁通入总胆管,后运至胆囊。''' '''猪肝的肝小叶明显,呈现六边形;小鼠与人的则不明显。''' '''''二、福尔根反应''''' '''原理:'''DNA经过'''1mol/L的HCl'''水解,嘌呤碱与脱氧核糖之间的共价键被打断,露出C1的醛基,再与希夫试剂反应。(1mol/L盐酸不会氧化多糖,也不会水解RNA,避免多糖和RNA的影响)[[文件:根尖分生区.jpg|缩略图|192x192像素|根尖分生区1(希夫试剂染色)]] [[文件:E958ff0e1f8d32b62f7598876786addb(20250603-143246).jpg|缩略图|168x168像素|根尖分生区2]] '''材料:'''根尖,1mol/LHCl,希夫试剂,清水 '''步骤:''' 1、取3~5个根尖,轻轻擦干(防止盐酸稀释),放入装有1mol/L HCl 的EP管中('''60度10min''') 2、吸干EP管中的盐酸,加入清水'''漂洗3次,一次30s''' 3、将根尖移入希夫试剂中,避光染色'''15~20min''' 4、根尖被染为紫红色,取出根尖,用刀片切下'''最前端(米粒大小)''' 5、在载玻片上滴加一滴清水,放上根尖,盖上载玻片,用枪尖/镊子钝头'''轻轻敲击(均匀)''' 6、压片:盖上一张吸水纸,'''用拇指用力下压''' 7、镜下观察(间、前、中、末) ''注意:挑根时注意要带有根尖;不要用镊子夹根尖。'' '''''<big>三、Brachet反应</big>''''' '''原理:'''甲基绿-吡咯红为碱性染料,合成Unna试剂,其中甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现蓝绿色,吡咯红(派洛宁)易与聚合程度低的RNA结合呈现红色。 '''步骤:''' 1、蛙——双毁髓——打开胸腔——蛙心取血——抗凝 [[文件:蛙心.jpg|缩略图|198x198像素|蛙心红细胞涂片(甲基绿-吡咯红染色)]] 2、涂片:①在一个载玻片上滴上血②斜着另一个载玻片(在45度角之下)涂片③自然晾干 ''(注意:载玻片干净;血量适中;'''血滴在45度角之下''';匀速)'' 3、固定:'''95%乙醇'''固定'''5分钟''' 4、漂洗——'''轻轻晾干、擦干'''——滴加unna染液(''保持染料不干''),染色'''15min''' 5、漂洗——加入'''丙酮,2s'''——'''晾干''' 6、镜检 === 第二模块 === ==== 一、植物学实验 ==== ===== Ⅰ、实验基本操作 ===== '''''一、显微镜的使用''''' 无他,记一下科勒照明。 '''''二、制片技术''''' '''切片'''(洋葱鳞片叶)、'''涂片'''(番茄果肉)、'''刮片'''(辣椒表皮,观察初生纹孔场) ''(PS:洋葱外表皮有紫色液泡,内表皮液泡无色;若要观察胞间连丝,可使用柿胚乳)'' '''''三、人工切片''''' '''注意事项:①横切时记得使用双面刀片,单面刀片太厚了。②多切一些,以量取胜。③无他,唯手熟尔。''' '''''四、植物组织观察''''' '''1、保护组织''' '''2、同化组织''' 黑藻(ps:黑藻是被子植物),还可以观察到胞质环流 '''3、疏导组织''' 黄豆芽(纵切),不用绿豆芽(输导组织不发达),番红染色(间苯三酚染木质素特异性更强,但需要高氢离子浓度) '''4、机械组织''' 厚角组织(**芹菜的茎,人工切片,位于维管束外侧,中间隔了一些薄壁组织),石细胞(梨的果实,涂片,番红染色) '''5、分泌组织''' 分泌道、分泌腔【裂生型、溶生型、裂溶生型(**柑橘皮人工切片)】''(PS:裂生型周围细胞完整,溶生型不完整)'' '''''五、植物内含物观察(染料)''''' '''1、淀粉''' 玉米胚乳(碘液,淀粉粒被染为黑蓝色) '''2、蛋白质''' <nowiki>**</nowiki>小麦糊粉层(碘液,糊粉粒被染为黄色) '''3、油类''' 花生(苏丹系列染料,油滴特异性染为橘红色) '''4、结晶''' 菠萝细胞液(无需细胞结构/无需染色,直接可以观察到草酸钙针状结晶) ===== Ⅱ、植物营养器官切片”鉴赏“ ===== [https://docs.qq.com/pdf/DSW5WbmJxaU9rTU51?_t=1748780526479&nlc=1&u=6b59186c66fc424a98ba81b5bece2df5]切片 ===== Ⅲ、植物检索表的使用与制作 ===== ===== Ⅳ、植物繁殖器官解剖 ===== '''''一、花图式''''' <nowiki>*</nowiki>花被卷叠式的判断需要使用花蕾。 '''''二、花程式''''' '''''三、各种代表性植物花的解剖''''' '''1、木兰类''' 木兰科-含笑属-白兰 '''2、单子叶植物''' 六出花科-六出花 兰科-石斛 禾本科-小麦 '''3、(蔷薇超群)锦葵类''' 十字花科-豆瓣菜 '''4、(蔷薇超群)豆类''' 蔷薇科-粉花绣线菊 '''5、(菊类超群)石竹,示特立中央胎座''' '''6、(菊类超群)唇形类''' 木樨科-女贞 '''7、(菊类超群)桔梗类''' 菊科-向日葵 === 第三模块 === ==== <big>一、动物学实验</big> ==== ===== Ⅰ、河蚌解剖 ===== '''''一、分类(到种)''''' 注意平时常见的解剖对象大概率是皱纹冠蚌而非无齿蚌(本人经验) '''''二、形态结构''''' 1、贝壳位置区分(前后、背腹、左右) 2、测量(清华年喜欢考测量):壳长、壳宽、壳厚 3、贝壳外部形态 ①壳顶②韧带(有内外之分,扇贝是内韧带,河蚌和文蛤是外韧带)③生长线 4、贝壳内部形态 ①壳顶②韧带③铰合部(无齿蚌无后侧齿,冠蚌有) 5、肌肉痕迹:前后闭壳肌、前后缩足肌、前伸足肌、外套膜原肌(外套线)、水管肌(外套窦) '''''三、内部解剖结构'''''(体分部:足部、内脏团、外套膜、外套腔)建议解剖时按一下顺序观察 '''1、外套膜('''出背入腹) '''2、肌肉系统'''(见上) '''3、呼吸系统'''(两对瓣鳃,其中外瓣鳃在雌性中变为育儿囊)''PS:牡蛎和扇贝仅一对瓣鳃'' '''4、循环系统''' 围心腔膜、围心腔、心脏(一心室两心耳) 动脉管:前/后大动脉 补充:心跳实验——加兴奋剂(升温)/抑制剂(降温),观察河蚌心跳变化 '''5、排泄系统''' 围心腔腺(即为凯伯尔氏器,两个,咖啡色,在心脏前)肾脏(肾口、肾小体、膀胱、肾孔→外套腔)PS:肾口紧靠生殖孔,大而光滑的是肾口 '''6、神经系统''' 脑神经节(两个,位于三肌之间)足神经节(一个,位于足与内脏团相接处)脏神经节(位于后闭壳肌肌肉柱上) '''7、消化系统''' (两对)唇瓣(切忌不要弄掉了)、口、咽、食道、胃、晶杆(搅拌、分泌消化物质、有或无)、胰脏、肝脏(中肠腺)、肠(盘曲于足内)、直肠(穿过心室)、肛门(后闭壳肌顶) '''8、生殖系统:'''生殖腺,雄白雌黄,内脏团内除消化系统外大部分 '''''四、问题扩展''''' 请以现有条件设计实验证明河蚌的摄食方法和食性。(提示:可以利用食物残渣) ===== Ⅱ、文蛤解剖(主要是记住与河蚌的不同点) ===== 1、文蛤的壳顶前为小月面,后为盾面。 2、有铰合齿,三枚;左壳前侧齿一枚,右壳两枚。 3、肌肉痕迹中,前缩足肌在前闭壳肌上方。 4、50度温水可以使文蛤开壳。 5、其后端愈合为出入水管。 6、围心腔腺在心耳上。 7、肾脏在围心腔外。(河蚌在内) 8、神经节红色容易观察。(脑神经节移至前闭壳肌背上方) 9、晶杆更容易被观察到。 10、文蛤穴居。 ===== Ⅲ、克氏原鳌虾解剖 ===== '''''一、分类、检索''''' '''''二、外形结构''''' '''1、分部:'''头(6)胸(8)部、腹(7)部''(因为头部第一体节和腹部最后一·体节无附肢,故附肢数只有19)'' '''2、各部分附属物(不包括附肢)''' ①头胸部:头胸甲:额剑(鳌虾上下扁平/对虾则左右扁平),有齿,可作为分类标准;鳃盖(有刺,胃刺、肝刺);颈沟 柄眼:复眼(切片观察形状),测量——小眼(方形)/复眼的面积、小眼的数目 ②腹部:外骨骼:背板/侧板/腹板 注意雌雄的区别 ③体表开孔:雌雄均有:绿腺孔(大触角),肛门,口 雌性特有:雌孔(第三步足基部一对),纳精囊孔(第四、五对步足之间) 雄性特有:雄孔(第五步足基部) 3、(建议从后往前解剖) {| class="wikitable" |+附肢(头5胸8腹6) !名称 !类型 !原肢节数 !功能 |- |小触角 |单 |3 |感觉、平衡、触觉 |- |大触角 |双 |2 |感觉、触觉 |- |大颚 | |2 |嚼食 |- |第一小颚 | |2 |摄食、感觉 |- |第二小颚(颚舟片) |双,自此往下均为双肢型 |2 |摄食、辅助呼吸 |- |第一颚足 | |1 |摄食、感觉、呼吸 |- |第二颚足 | |2 |摄食、感觉 |- |第三颚足 | |2 |摄食、感觉 |- |第一步足 | |2,自此往下均为2 |取食 |- |二 | | |取食、攻击 |- |三、四、五 | | |步行 |- |第一腹足(雌性退化) | | |游泳,辅助生殖 |- |二~五 | | |游泳 |- |六(尾肢) | | |与尾节结合组成尾扇 |- |雄性第一、二对腹足 | | |交接肢,辅助输精 |} ps:步足分为底节、基节、座节、长节、腕节、掌节、指节 '''''三、内部结构''''' '''1、''' {| class="wikitable" |+呼吸系统(鳃连于附肢) !鳃的类型 !鳌虾 !对虾、基围虾 !沼虾 |- |侧鳃 |0 |6 |6 |- |足鳃 |6(第二颚足到第四步足) |6 |1 |- |关节鳃 |11(第二颚足一对,第三颚足到第四步足两对) |12 |1 |- |肢鳃 |1 |2 |3 |} '''2、循环系统''' 组成:心脏(无心耳)-心孔三对-动脉管7条(咽动脉1/触角动脉2/肝动脉2/腹上动脉1/胸直动脉1) '''3、生殖系统''' 呈现H型,颜色越深,发育越成熟 '''4、消化系统''' 口、咽、食道、胃、中肠(肝)、后肠、肛门 胃磨(三个硬质突起,属于贲门胃)与过滤器(隔板和刚毛,属于幽门胃) 胼胝体??? '''5、排泄系统(绿腺)''' 腺体部上有凸起(端囊),下以排泄管(白色海绵体)连接膀胱,膀胱有排泄孔。 '''6、神经系统''' 脑神经(三对?) 围咽神经环 咽下神经(头部后三对神经节(口器)和胸部前三对神经节(足)愈合形成) 腹神经(胸5腹6) '''7、肌肉系统''' 制片(成束横纹肌) '''''四、问题扩展''''' 以现有条件设计实验证明克氏原鳌虾的食性。 ===== Ⅲ、蝗虫解剖 ===== '''''一、分类、检索、种(棉蝗/大青蝗)''''' '''''二、外形结构''''' '''体分部''' '''头:'''外骨骼(额、颊、头顶、后头),触角(分三节,柄根鞭,鞭节分亚节,丝状触角),单眼(3,倒品型),复眼(肾形,小眼则成六边形),*口器(上唇、上颚、下颚、下唇、舌(功能?)) '''胸:'''翅(革质+膜质,覆翅,翅脉/脉向),三对足(前跗:中垫+爪/跗节分为真(3)假体节,跗节式:3/3/3)两对气门,外骨骼(背/腹/侧板,前胸背板大、侧板小) '''腹:'''分节【背板(雌雄:1~8正常,9+10愈合,11-肛上板),侧板(11-肛侧板),腹板(雌性:1~7正常,8以后愈合,并形成导卵器;雄性:1~8正常,9以后愈合,并形成生殖下版)】,附肢(肛须,由10或11体节的附肢变来;产卵瓣),听器,八对气门,外生殖器 '''''三、内部结构''''' '''1、呼吸系统''' 气门,气囊(气门气囊,仅储藏;内脏气囊,还可交换),气管(支气管制片) '''2、循环系统''' 心脏(八个心室,每个心室旁连有翼状肌,八对心孔,后端封闭,血液从心孔入,从前部的背大动脉流出) '''3、生殖系统''' 悬系带——两侧附性腺——卵巢——两侧输卵管——在第七节愈合为总输卵管——通到第八节(此处还连有纳精囊,仅一个) 悬系带——精巢——输精管——射精管——阴茎(还连有贮精囊) '''4、消化系统''' 口、咽、食道、嗉囊、砂囊(被从后发出的6对胃盲囊遮盖)、中肠(胃)、回肠、结肠、直肠 消化腺:胃盲囊,唾液腺(腺体+唾液管,在胸部) '''5、排泄系统''' 马氏管(单细胞围成,250余条,制片),脂肪体(尿酸) '''6、神经系统''' 脑:围咽神经、单眼神经(3)、复眼神经(2)、围食道神经 围咽神经 咽下神经(头后3,胸前3) 腹神经:胸3腹5(不包括咽下神经) '''7、肌肉系统''' 胸部肌肉制片 ===== '''Ⅴ、家蚕解剖''' ===== '''''一、分类、检索、科''''' '''''二、外形结构''''' '''体分部''' '''头:'''触角一对(短小,分三节,丝/刚毛状),口器(咀嚼式,下唇由吐丝孔),外骨骼(头部有Y形蜕裂缝),单眼(6对,侧单眼) '''胸:'''气门一对,胸足三对(分节,具爪) '''腹:'''气门八对,腹足五对(最后一对称为臀足,不分节,具钩列,被称为伪足),雌性臀足前有四孔,雄性仅两孔 '''''三、内部结构''''' '''1、循环系统''' 心脏:直管状(背/肠壁上,通过从侧部解剖可以观察到) '''2、呼吸系统''' 气门、支气管(制片)呈现辐射状 '''3、消化系统(背部解剖时小心)''' 口、咽、食道、肠(中肠+回/结/直肠) 无消化腺,特化为丝腺 '''4、丝腺系统''' (从前往后)口器——射丝部—分叉—输送部?——贮泌部——泌丝部 '''5、排泄系统''' 马氏管(在回肠前,两个各分三支),脂肪体(白色,不是蝗虫的黄色) '''6、生殖系统''' 生殖芽球 '''7、神经系统''' 口球神经(很小)——一对脑神经节——咽下神经节——围食道神经——腹神经(胸5腹6) 包括脑神经节、咽下神经节、腹神经在内,一共13对神经节 === 第四模块 ===
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