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一些问题思考2
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1、异丙醇chendianDNA的原理是什么?异丙醇用来沉淀DNA时,会产生什么影响? <sub>'''脱水促沉,会出现短链RNA的丢失'''</sub> 2、高质量的DNA电泳特征是什么?根据实验结果,判断本次提取的DNA的品质,其中RNA是否去除干净? '''<sub>聚集的一条带</sub>''' 3、如果DNA产量过低,或者电泳后没有明显条带,可能的原因是什么? 4、怎样检测基因组DNA的含量和纯度? '''<sub>OD值,电泳</sub>''' 5、在沉淀DNA之前,常常在溶液中加入食盐,其作用是什么? '''<sub>促进DNA沉淀</sub>''' 6、有人在提取RNA时,加入异丙醇前还加入糖原,作用是什么? '''<sub>单细胞提取RNA时,糖原可以富集、指示沉淀</sub>''' 7、基因组DNA电泳时,在DNA的条带的上样孔方向出现条带拖尾的弥散样显影,请问可能的原因是什么? '''<sub>溶解不完全</sub>''' 8、基因组DNA提取与质粒DNA提取有何异同? '''<sub>裂解液不同(SDS+EDTA/SDS+NaOH),有无变形过程</sub>''' 9、当提取到的基因组DNA含量过低时,为了扩增得到足够量的保真性好的目的基因产物,可以采用什么方法? '''<sub>增效PCR</sub>''' 10、PCR时,模板DNA中含有大量的EDTA,会产生什么后果? <sub>'''聚合酶变性'''</sub> 11、70%乙醇的作用可能是什么? '''<sub>洗涤基因组DNA,去掉盐和脂类</sub>''' 12、基因组DNA提取时,除去蛋白质的方法有哪些? '''<sub>蛋白酶K,酚氯仿抽提,乙酸乙酸钾沉淀(不能用CTAB)</sub>''' 13、如何设计实验确定某基因的一段外显子缺失?请写出三种实验方案。 '''<sub>SB、测序、PCR</sub>''' 14、提取RNA时,利用Trizol试剂的主要成分是什么,其作用是什么?其中还加入了盐酸胍、8-羟基喹啉、异硫氰酸胍,其作用是什么?充分研磨后,加入氯仿的作用是什么? '''<sub>苯酚(裂解、变性);辅助变性RNase;抽提苯酚。</sub>''' 15、DNA提取时,得到的DNA OD<sub>260nm</sub>/OD<sub>280nm</sub><1.6, OD<sub>260nm</sub>/OD<sub>230nm</sub><1.0,可能存在什么污染?OD<sub>260nm</sub>/OD<sub>280nm</sub>=1.8, OD<sub>260nm</sub>/OD<sub>230nm</sub><1.0,可能存在什么污染? '''<sub>含芳香环的物质(注意不是所有蛋白质都含有芳香环),有酰胺键</sub>'''
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