植物中的硫化氢：修订间差异
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=== 拟南芥中可以产生H2S的酶 === | |||
拟南芥中半胱氨酸脱巯基酶有四种： | 拟南芥中半胱氨酸脱巯基酶有四种： | ||
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* NFS2，质体 | * NFS2，质体 | ||
在铁硫簇的形成过程中起作用，以PLP为辅酶，LCys输出单质硫和丙氨酸。如果存在还原剂，S会变成H2S。 | |||
β氰丙氨酸合酶CAS： | |||
* CYS-C1线粒体 | |||
* CYS-D1细胞质 | |||
* CYS-D2细胞质 | |||
PLP，将氰化物和Cys合成β氰丙氨酸和H2S。 | |||
动物细胞内能够催化H2S生成的酶主要有 ３个：胱硫醚 γ⁃裂解酶、胱硫醚 β⁃合酶和 ３⁃巯基丙酮酸硫转移酶 。 | |||
=== 如何检测内源H2S含量 === | |||
==== 间接测定：提取H2S产生酶，通过测定酶活力反应H2S含量。 ==== | |||
'''亚甲基蓝法'''：醋酸锌吸附植物产生的H2S，用强酸将其释放，释放出的H2S与NN二甲基苯二胺反应生成亚甲基蓝，检测670nm吸光值即可知道H2S含量。 | |||
缺点： | |||
* 低浓度下检测不到 | |||
* 高浓度下亚甲基蓝形成二聚体/三聚体，违反朗博-比尔定律。 | |||
* 亚甲基蓝颜色随着时间会发生改变。 | |||
* 不能实现实时监测和亚细胞检测。 | |||
==== 直接测定 ==== | |||
亚甲基蓝法：向植物组织加入浓盐酸，释放H2S；因为结合态硫化物变为游离的H2S，因此测得高于实际含量。 | |||
色谱法：气相色谱直接分离H2S来测定，高效液相色谱将HS-离子与MBB反应生成硫化二胺检测其荧光。灵敏度高，但也不能实现实时监测和定位。 | |||
电极法：微小的H2S电极可以插入活体组织，检测H2S浓度。比较适合动物组织，植物组织较困难。对外部环境（温度、震动）非常敏感。可以实现特定组织的实时监测。 | |||
荧光探针法 | |||
2025年1月8日 (三) 10:30的最新版本
拟南芥中可以产生H2S的酶
拟南芥中半胱氨酸脱巯基酶有四种：
- LCD-L型cys，细胞核
- DCD1-D型Cys，线粒体
- DCD2-L+D型的Cys，线粒体
- DES1-L型Cys，细胞质
以磷酸吡哆醛为辅酶，降解Cys产生H2S，氨和丙酮酸。
半胱氨酸脱硫酶：
- NFS1，线粒体
- NFS2，质体
在铁硫簇的形成过程中起作用，以PLP为辅酶，LCys输出单质硫和丙氨酸。如果存在还原剂，S会变成H2S。
β氰丙氨酸合酶CAS：
- CYS-C1线粒体
- CYS-D1细胞质
- CYS-D2细胞质
PLP，将氰化物和Cys合成β氰丙氨酸和H2S。
动物细胞内能够催化H2S生成的酶主要有 ３个：胱硫醚 γ⁃裂解酶、胱硫醚 β⁃合酶和 ３⁃巯基丙酮酸硫转移酶 。
如何检测内源H2S含量
间接测定：提取H2S产生酶，通过测定酶活力反应H2S含量。
亚甲基蓝法：醋酸锌吸附植物产生的H2S，用强酸将其释放，释放出的H2S与NN二甲基苯二胺反应生成亚甲基蓝，检测670nm吸光值即可知道H2S含量。
缺点：
- 低浓度下检测不到
- 高浓度下亚甲基蓝形成二聚体/三聚体，违反朗博-比尔定律。
- 亚甲基蓝颜色随着时间会发生改变。
- 不能实现实时监测和亚细胞检测。
直接测定
亚甲基蓝法：向植物组织加入浓盐酸，释放H2S；因为结合态硫化物变为游离的H2S，因此测得高于实际含量。
色谱法：气相色谱直接分离H2S来测定，高效液相色谱将HS-离子与MBB反应生成硫化二胺检测其荧光。灵敏度高，但也不能实现实时监测和定位。
电极法：微小的H2S电极可以插入活体组织，检测H2S浓度。比较适合动物组织，植物组织较困难。对外部环境（温度、震动）非常敏感。可以实现特定组织的实时监测。
荧光探针法