一些问题思考2

1、异丙醇chendianDNA的原理是什么？异丙醇用来沉淀DNA时，会产生什么影响？

_{脱水促沉，会出现短链RNA的丢失}

2、高质量的DNA电泳特征是什么？根据实验结果，判断本次提取的DNA的品质，其中RNA是否去除干净？

_{聚集的一条带}

3、如果DNA产量过低，或者电泳后没有明显条带，可能的原因是什么？

4、怎样检测基因组DNA的含量和纯度？

_{OD值，电泳}

5、在沉淀DNA之前，常常在溶液中加入食盐，其作用是什么？

_{促进DNA沉淀}

6、有人在提取RNA时，加入异丙醇前还加入糖原，作用是什么？

_{单细胞提取RNA时，糖原可以富集、指示沉淀}

7、基因组DNA电泳时，在DNA的条带的上样孔方向出现条带拖尾的弥散样显影，请问可能的原因是什么？

_{溶解不完全}

8、基因组DNA提取与质粒DNA提取有何异同？

_{裂解液不同（SDS+EDTA/SDS+NaOH），有无变形过程}

9、当提取到的基因组DNA含量过低时，为了扩增得到足够量的保真性好的目的基因产物，可以采用什么方法？

_增效PCR

10、PCR时，模板DNA中含有大量的EDTA，会产生什么后果？

_{聚合酶变性}

11、70%乙醇的作用可能是什么？

_{洗涤基因组DNA，去掉盐和脂类}

12、基因组DNA提取时，除去蛋白质的方法有哪些？

_{蛋白酶K，酚氯仿抽提，乙酸乙酸钾沉淀（不能用CTAB）}

13、如何设计实验确定某基因的一段外显子缺失？请写出三种实验方案。

_{SB、测序、PCR}

14、提取RNA时，利用Trizol试剂的主要成分是什么，其作用是什么？其中还加入了盐酸胍、8-羟基喹啉、异硫氰酸胍，其作用是什么？充分研磨后，加入氯仿的作用是什么？

_{苯酚（裂解、变性）；辅助变性RNase；抽提苯酚。}

15、DNA提取时，得到的DNA OD_260nm/OD_280nm<1.6， OD_260nm/OD_230nm<1.0,可能存在什么污染？OD_260nm/OD_280nm=1.8， OD_260nm/OD_230nm<1.0,可能存在什么污染？

_{含芳香环的物质（注意不是所有蛋白质都含有芳香环），有酰胺键}