生化分子细胞技术列表:修订间差异
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创建页面,内容为“* 染色体构象捕获 ** 3C ** 4C ** 5C ** Hi-C ** ChIP-loop ** ChIA-PET * 蛋白质-蛋白质互作 ** Y2H酵母双杂交 ** CoIP免疫共沉淀 ** pull down下拉实验 ** FERT荧光共振能量转移 ** BiFC双分子荧光互补 ** SPR表面等离子共振 ** ITC等温滴定量热法 * 蛋白质-RNA互作 ** RIP-RNA结合蛋白免疫共沉淀:甲醛交联,裂解细胞,抗体沉淀特定蛋白,去交联获得RNA。 ** RNA pull down:标记的诱饵…” |
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** middle eastern:DNA检测RNA | ** middle eastern:DNA检测RNA | ||
** far western:检测脂质 | ** far western:检测脂质 | ||
* 层析/色谱技术 | |||
** 凝胶过滤层析 | |||
** 亲和层析 | |||
*** IMAC | |||
** 聚焦层析:固定相上有缓冲剂,酸性的层析液流过,从上到下被缓冲,形成ph梯度;蛋白质会在进入等电点以上的pH后吸附在层析柱上;随着层析液不断流入,层析柱缓冲能力被逐渐耗竭,pH梯度移动(原来某一pH的位置下移),不同的蛋白就随等电点相应的梯度流出。 | |||
** 离子交换层析 | |||
** 疏水层析 | |||
** 反向层析 | |||
* 克隆某特定基因的办法 | |||
** 功能克隆:已知基因产物(蛋白质),获得编码序列 | |||
** 定位克隆:已知基因位置,染色体步移 | |||
** 序列克隆:已知基因部分序列,获得全部序列 | |||
** 表型克隆: | |||
* 基因克隆的具体技术 | |||
** 鸟枪克隆法:将基因组打成片段,转入受体,寻找相关表型变化 | |||
** 消减杂交:将两份cDNA混合,去除双链,剩余的可能是与表型差异有关的序列。 | |||
** 转座子标签:转座子插入使得基因突变,在有相关表型改变的个体中寻找转座子,就能找到被突变的基因。 | |||
** 图位克隆:染色体步移 |
2024年8月4日 (日) 00:11的版本
- 染色体构象捕获
- 3C
- 4C
- 5C
- Hi-C
- ChIP-loop
- ChIA-PET
- 蛋白质-蛋白质互作
- Y2H酵母双杂交
- CoIP免疫共沉淀
- pull down下拉实验
- FERT荧光共振能量转移
- BiFC双分子荧光互补
- SPR表面等离子共振
- ITC等温滴定量热法
- 蛋白质-RNA互作
- RIP-RNA结合蛋白免疫共沉淀:甲醛交联,裂解细胞,抗体沉淀特定蛋白,去交联获得RNA。
- RNA pull down:标记的诱饵RNA与细胞裂解物孵育;检测与诱饵RNA结合的蛋白
- MeRIP-RNA甲基化免疫沉淀:用甲基化RNA特异抗体沉淀并检测结合蛋白
- 染色质开放性检测
- MNase-seq
- FAIRE-seq
- DNase-seq
- ATAC-seq
- 各种印记
- western blotting:蛋白质
- northern blotting:RNA
- southern blotting:DNA
- eastern blotting:二维电泳蛋白质
- dot blotting :不经电泳
- Southwestern blotting:DNA探针检测蛋白质电泳结果
- Far-western blotting:不用抗体而用可能互作的蛋白
- northwestern blotting:RNA探针检测蛋白质电泳结果
- middle eastern:DNA检测RNA
- far western:检测脂质
- 层析/色谱技术
- 凝胶过滤层析
- 亲和层析
- IMAC
- 聚焦层析:固定相上有缓冲剂,酸性的层析液流过,从上到下被缓冲,形成ph梯度;蛋白质会在进入等电点以上的pH后吸附在层析柱上;随着层析液不断流入,层析柱缓冲能力被逐渐耗竭,pH梯度移动(原来某一pH的位置下移),不同的蛋白就随等电点相应的梯度流出。
- 离子交换层析
- 疏水层析
- 反向层析
- 克隆某特定基因的办法
- 功能克隆:已知基因产物(蛋白质),获得编码序列
- 定位克隆:已知基因位置,染色体步移
- 序列克隆:已知基因部分序列,获得全部序列
- 表型克隆:
- 基因克隆的具体技术
- 鸟枪克隆法:将基因组打成片段,转入受体,寻找相关表型变化
- 消减杂交:将两份cDNA混合,去除双链,剩余的可能是与表型差异有关的序列。
- 转座子标签:转座子插入使得基因突变,在有相关表型改变的个体中寻找转座子,就能找到被突变的基因。
- 图位克隆:染色体步移