生化分子细胞技术列表:修订间差异

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创建页面,内容为“* 染色体构象捕获 ** 3C ** 4C ** 5C ** Hi-C ** ChIP-loop ** ChIA-PET * 蛋白质-蛋白质互作 ** Y2H酵母双杂交 ** CoIP免疫共沉淀 ** pull down下拉实验 ** FERT荧光共振能量转移 ** BiFC双分子荧光互补 ** SPR表面等离子共振 ** ITC等温滴定量热法 * 蛋白质-RNA互作 ** RIP-RNA结合蛋白免疫共沉淀:甲醛交联,裂解细胞,抗体沉淀特定蛋白,去交联获得RNA。 ** RNA pull down:标记的诱饵…”
 
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** middle eastern:DNA检测RNA
** middle eastern:DNA检测RNA
** far western:检测脂质
** far western:检测脂质
* 层析/色谱技术
** 凝胶过滤层析
** 亲和层析
*** IMAC
** 聚焦层析:固定相上有缓冲剂,酸性的层析液流过,从上到下被缓冲,形成ph梯度;蛋白质会在进入等电点以上的pH后吸附在层析柱上;随着层析液不断流入,层析柱缓冲能力被逐渐耗竭,pH梯度移动(原来某一pH的位置下移),不同的蛋白就随等电点相应的梯度流出。
** 离子交换层析
** 疏水层析
** 反向层析
* 克隆某特定基因的办法
** 功能克隆:已知基因产物(蛋白质),获得编码序列
** 定位克隆:已知基因位置,染色体步移
** 序列克隆:已知基因部分序列,获得全部序列
** 表型克隆:
* 基因克隆的具体技术
** 鸟枪克隆法:将基因组打成片段,转入受体,寻找相关表型变化
** 消减杂交:将两份cDNA混合,去除双链,剩余的可能是与表型差异有关的序列。
** 转座子标签:转座子插入使得基因突变,在有相关表型改变的个体中寻找转座子,就能找到被突变的基因。
** 图位克隆:染色体步移

2024年8月4日 (日) 00:11的版本

  • 染色体构象捕获
    • 3C
    • 4C
    • 5C
    • Hi-C
    • ChIP-loop
    • ChIA-PET
  • 蛋白质-蛋白质互作
    • Y2H酵母双杂交
    • CoIP免疫共沉淀
    • pull down下拉实验
    • FERT荧光共振能量转移
    • BiFC双分子荧光互补
    • SPR表面等离子共振
    • ITC等温滴定量热法
  • 蛋白质-RNA互作
    • RIP-RNA结合蛋白免疫共沉淀:甲醛交联,裂解细胞,抗体沉淀特定蛋白,去交联获得RNA。
    • RNA pull down:标记的诱饵RNA与细胞裂解物孵育;检测与诱饵RNA结合的蛋白
    • MeRIP-RNA甲基化免疫沉淀:用甲基化RNA特异抗体沉淀并检测结合蛋白
  • 染色质开放性检测
    • MNase-seq
    • FAIRE-seq
    • DNase-seq
    • ATAC-seq
  • 各种印记
    • western blotting:蛋白质
    • northern blotting:RNA
    • southern blotting:DNA
    • eastern blotting:二维电泳蛋白质
    • dot blotting :不经电泳
    • Southwestern blotting:DNA探针检测蛋白质电泳结果
    • Far-western blotting:不用抗体而用可能互作的蛋白
    • northwestern blotting:RNA探针检测蛋白质电泳结果
    • middle eastern:DNA检测RNA
    • far western:检测脂质
  • 层析/色谱技术
    • 凝胶过滤层析
    • 亲和层析
      • IMAC
    • 聚焦层析:固定相上有缓冲剂,酸性的层析液流过,从上到下被缓冲,形成ph梯度;蛋白质会在进入等电点以上的pH后吸附在层析柱上;随着层析液不断流入,层析柱缓冲能力被逐渐耗竭,pH梯度移动(原来某一pH的位置下移),不同的蛋白就随等电点相应的梯度流出。
    • 离子交换层析
    • 疏水层析
    • 反向层析
  • 克隆某特定基因的办法
    • 功能克隆:已知基因产物(蛋白质),获得编码序列
    • 定位克隆:已知基因位置,染色体步移
    • 序列克隆:已知基因部分序列,获得全部序列
    • 表型克隆:
  • 基因克隆的具体技术
    • 鸟枪克隆法:将基因组打成片段,转入受体,寻找相关表型变化
    • 消减杂交:将两份cDNA混合,去除双链,剩余的可能是与表型差异有关的序列。
    • 转座子标签:转座子插入使得基因突变,在有相关表型改变的个体中寻找转座子,就能找到被突变的基因。
    • 图位克隆:染色体步移