用户:野狼君卡共和/实验笔记本
第一模块
一、细胞学实验
一、PAS反应（高碘酸-Schiff反应）
实验原理：高碘酸将多糖中的C-C键打断，生成乙二醇，并氧化为乙二醛；乙二醛与希夫试剂（无色品红）反应，产生紫红色。
实验材料：小鼠肝脏组织，酒精，水，二甲苯，高碘酸，希夫试剂，亚硫酸水
石蜡切片过程：肝脏组织块——固定（维持其状态，4%甲醛/10%福尔马林）——梯度酒精脱水（70%-80%-90%-95%-无水乙醇）——透明（二甲苯）——浸蜡——包埋成蜡块——切片（石蜡切片机，2~4μm）——展片-捞片-烤干——///脱蜡（二甲苯）——梯度酒精复水（100%-95%-75%-纯水）——染色（PAS试剂）——梯度酒精脱水——封片（含有二甲苯的中性树胶）——晾片（2~3天）——永久切片
实验步骤（上述'///'后）：
1、从烤箱中取出切片，趁热（石蜡成液态，效率高）放入二甲苯中，静置10min。
2、用铅笔写名字（***区分正反），依次投入无水乙醇（3min）、95%乙醇（3min）、75%乙醇（3min）、清水（1min）
3、用吸水纸将组织周围的水轻轻擦干；用滴管向组织上滴加高碘酸（完全没过组织），氧化10min
4、将切片投入75%乙醇片刻（洗净高碘酸），吸干
5、滴加希夫试剂，避光静置15~30min
6、向组织上滴加亚硫酸水，漂洗（1次30秒，漂洗2~3次）
7、梯度酒精脱水：75%乙醇（2min）、95%乙醇（2min）、无水乙醇（2min），然后充分晾干
8、封片
PS：偏重亚硫酸钠+酸+碱性品红生成无色品红，再加入活性炭震荡，过滤，即可生成遇醛变红的希夫试剂。
捎带一些理论知识：
肝动脉与肝门静脉汇合通入肝静脉；肝内胆管收集肝细胞分泌的胆汁通入总胆管，后运至胆囊。
猪肝的肝小叶明显，呈现六边形；小鼠与人的则不明显。
二、福尔根反应
原理：DNA经过1mol/L的HCl水解，嘌呤碱与脱氧核糖之间的共价键被打断，露出C1的醛基，再与希夫试剂反应。（1mol/L盐酸不会氧化多糖，也不会水解RNA，避免多糖和RNA的影响）
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材料：根尖，1mol/LHCl，希夫试剂，清水
步骤：
1、取3~5个根尖，轻轻擦干（防止盐酸稀释），放入装有1mol/L HCl
的EP管中（60度10min）
2、吸干EP管中的盐酸，加入清水漂洗3次，一次30s
3、将根尖移入希夫试剂中，避光染色15~20min
4、根尖被染为紫红色，取出根尖，用刀片切下最前端（米粒大小）
5、在载玻片上滴加一滴清水，放上根尖，盖上载玻片，用枪尖/镊子钝头轻轻敲击（均匀）
6、压片：盖上一张吸水纸，用拇指用力下压
7、镜下观察（间、前、中、末）
注意：挑根时注意要带有根尖；不要用镊子夹根尖。
三、Brachet反应
原理：甲基绿-吡咯红为碱性染料，合成Unna试剂，其中甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现蓝绿色，吡咯红（派洛宁）易与聚合程度低的RNA结合呈现红色。
步骤：
1、蛙——双毁髓——打开胸腔——蛙心取血——抗凝
2、涂片：①在一个载玻片上滴上血②斜着另一个载玻片（在45度角之下）涂片③自然晾干
（注意：载玻片干净；血量适中；血滴在45度角之下；匀速）
3、固定：95%乙醇固定5分钟
4、漂洗——轻轻晾干、擦干——滴加unna染液（保持染料不干），染色15min
5、漂洗——加入丙酮，2s——晾干
6、镜检
第二模块
一、植物学实验
Ⅰ、实验基本操作
一、显微镜的使用
无他，记一下科勒照明。
二、制片技术
切片（洋葱鳞片叶）、涂片（番茄果肉）、刮片（辣椒表皮，观察初生纹孔场）
（PS：洋葱外表皮有紫色液泡，内表皮液泡无色；若要观察胞间连丝，可使用柿胚乳）
三、人工切片
注意事项：①横切时记得使用双面刀片，单面刀片太厚了。②多切一些，以量取胜。③无他，唯手熟尔。
四、植物组织观察
1、保护组织
2、同化组织
黑藻（ps：黑藻是被子植物），还可以观察到胞质环流
3、疏导组织
黄豆芽（纵切），不用绿豆芽（输导组织不发达），番红染色（间苯三酚染木质素特异性更强，但需要高氢离子浓度）
4、机械组织
厚角组织（**芹菜的茎，人工切片，位于维管束外侧，中间隔了一些薄壁组织），石细胞（梨的果实，涂片，番红染色）
5、分泌组织
分泌道、分泌腔【裂生型、溶生型、裂溶生型（**柑橘皮人工切片）】（PS：裂生型周围细胞完整，溶生型不完整）
五、植物内含物观察（染料）
1、淀粉
玉米胚乳（碘液，淀粉粒被染为黑蓝色）
2、蛋白质
**小麦糊粉层（碘液，糊粉粒被染为黄色）
3、油类
花生（苏丹系列染料，油滴特异性染为橘红色）
4、结晶
菠萝细胞液（无需细胞结构/无需染色，直接可以观察到草酸钙针状结晶）
Ⅱ、植物营养器官切片”鉴赏“
[1]切片
Ⅲ、植物检索表的使用与制作
Ⅳ、植物繁殖器官解剖
一、花图式
*花被卷叠式的判断需要使用花蕾。
二、花程式
三、各种代表性植物花的解剖
1、木兰类
木兰科-含笑属-白兰
2、单子叶植物
六出花科-六出花
兰科-石斛
禾本科-小麦
3、（蔷薇超群）锦葵类
十字花科-豆瓣菜
4、（蔷薇超群）豆类
蔷薇科-粉花绣线菊
5、（菊类超群）石竹，示特立中央胎座
6、（菊类超群）唇形类
木樨科-女贞
7、（菊类超群）桔梗类
菊科-向日葵
第三模块
一、动物学实验
Ⅰ、河蚌解剖
一、分类（到种）
注意平时常见的解剖对象大概率是皱纹冠蚌而非无齿蚌（本人经验）
二、形态结构
1、贝壳位置区分（前后、背腹、左右）
2、测量（清华年喜欢考测量）：壳长、壳宽、壳厚
3、贝壳外部形态
①壳顶②韧带（有内外之分，扇贝是内韧带，河蚌和文蛤是外韧带）③生长线
4、贝壳内部形态
①壳顶②韧带③铰合部（无齿蚌无后侧齿，冠蚌有）
5、肌肉痕迹：前后闭壳肌、前后缩足肌、前伸足肌、外套膜原肌（外套线）、水管肌（外套窦）
三、内部解剖结构（体分部：足部、内脏团、外套膜、外套腔）建议解剖时按一下顺序观察
1、外套膜（出背入腹）
2、肌肉系统（见上）
3、呼吸系统（两对瓣鳃，其中外瓣鳃在雌性中变为育儿囊）PS：牡蛎和扇贝仅一对瓣鳃
4、循环系统
围心腔膜、围心腔、心脏（一心室两心耳）
动脉管：前/后大动脉
补充：心跳实验——加兴奋剂（升温）/抑制剂（降温），观察河蚌心跳变化
5、排泄系统
围心腔腺（即为凯伯尔氏器，两个，咖啡色，在心脏前）肾脏（肾口、肾小体、膀胱、肾孔→外套腔）PS：肾口紧靠生殖孔，大而光滑的是肾口
6、神经系统
脑神经节（两个，位于三肌之间）足神经节（一个，位于足与内脏团相接处）脏神经节（位于后闭壳肌肌肉柱上）
7、消化系统
（两对）唇瓣（切忌不要弄掉了）、口、咽、食道、胃、晶杆（搅拌、分泌消化物质、有或无）、胰脏、肝脏（中肠腺）、肠（盘曲于足内）、直肠（穿过心室）、肛门（后闭壳肌顶）
8、生殖系统：生殖腺，雄白雌黄，内脏团内除消化系统外大部分
四、问题扩展
请以现有条件设计实验证明河蚌的摄食方法和食性。（提示：可以利用食物残渣）
Ⅱ、文蛤解剖（主要是记住与河蚌的不同点）
1、文蛤的壳顶前为小月面，后为盾面。
2、有铰合齿，三枚；左壳前侧齿一枚，右壳两枚。
3、肌肉痕迹中，前缩足肌在前闭壳肌上方。
4、50度温水可以使文蛤开壳。
5、其后端愈合为出入水管。
6、围心腔腺在心耳上。
7、肾脏在围心腔外。（河蚌在内）
8、神经节红色容易观察。（脑神经节移至前闭壳肌背上方）
9、晶杆更容易被观察到。
10、文蛤穴居。
Ⅲ、克氏原鳌虾解剖
一、分类、检索
二、外形结构
1、分部：头（6）胸（8）部、腹（7）部（因为头部第一体节和腹部最后一·体节无附肢，故附肢数只有19）
2、各部分附属物（不包括附肢）
①头胸部：头胸甲：额剑（鳌虾上下扁平/对虾则左右扁平），有齿，可作为分类标准；鳃盖（有刺，胃刺、肝刺）；颈沟
柄眼：复眼（切片观察形状），测量——小眼（方形）/复眼的面积、小眼的数目
②腹部：外骨骼：背板/侧板/腹板
注意雌雄的区别
③体表开孔：雌雄均有：绿腺孔（大触角），肛门，口
雌性特有：雌孔（第三步足基部一对），纳精囊孔（第四、五对步足之间）
雄性特有：雄孔（第五步足基部）
3、（建议从后往前解剖）
| 名称 | 类型 | 原肢节数 | 功能 |
|---|---|---|---|
| 小触角 | 单 | 3 | 感觉、平衡、触觉 |
| 大触角 | 双 | 2 | 感觉、触觉 |
| 大颚 | 2 | 嚼食 | |
| 第一小颚 | 2 | 摄食、感觉 | |
| 第二小颚（颚舟片） | 双，自此往下均为双肢型 | 2 | 摄食、辅助呼吸 |
| 第一颚足 | 1 | 摄食、感觉、呼吸 | |
| 第二颚足 | 2 | 摄食、感觉 | |
| 第三颚足 | 2 | 摄食、感觉 | |
| 第一步足 | 2，自此往下均为2 | 取食 | |
| 二 | 取食、攻击 | ||
| 三、四、五 | 步行 | ||
| 第一腹足（雌性退化） | 游泳，辅助生殖 | ||
| 二~五 | 游泳 | ||
| 六（尾肢） | 与尾节结合组成尾扇 | ||
| 雄性第一、二对腹足 | 交接肢，辅助输精 |
ps：步足分为底节、基节、座节、长节、腕节、掌节、指节
三、内部结构
1、
| 鳃的类型 | 鳌虾 | 对虾、基围虾 | 沼虾 |
|---|---|---|---|
| 侧鳃 | 0 | 6 | 6 |
| 足鳃 | 6（第二颚足到第四步足） | 6 | 1 |
| 关节鳃 | 11（第二颚足一对，第三颚足到第四步足两对） | 12 | 1 |
| 肢鳃 | 1 | 2 | 3 |
2、循环系统
组成：心脏（无心耳）-心孔三对-动脉管7条（咽动脉1/触角动脉2/肝动脉2/腹上动脉1/胸直动脉1）
3、生殖系统
呈现H型，颜色越深，发育越成熟
4、消化系统
口、咽、食道、胃、中肠（肝）、后肠、肛门
胃磨（三个硬质突起，属于贲门胃）与过滤器（隔板和刚毛，属于幽门胃）
胼胝体？？？
5、排泄系统（绿腺）
腺体部上有凸起（端囊），下以排泄管（白色海绵体）连接膀胱，膀胱有排泄孔。
6、神经系统
脑神经（三对？）
围咽神经环
咽下神经（头部后三对神经节（口器）和胸部前三对神经节（足）愈合形成）
腹神经（胸5腹6）
7、肌肉系统
制片（成束横纹肌）
四、问题扩展
以现有条件设计实验证明克氏原鳌虾的食性。
Ⅲ、蝗虫解剖
一、分类、检索、种（棉蝗/大青蝗）
二、外形结构
体分部
头：外骨骼（额、颊、头顶、后头），触角（分三节，柄根鞭，鞭节分亚节，丝状触角），单眼（3，倒品型），复眼（肾形，小眼则成六边形），*口器（上唇、上颚、下颚、下唇、舌（功能？））
胸：翅（革质+膜质，覆翅，翅脉/脉向），三对足（前跗：中垫+爪/跗节分为真（3）假体节，跗节式：3/3/3）两对气门，外骨骼（背/腹/侧板，前胸背板大、侧板小）
腹：分节【背板（雌雄：1~8正常，9+10愈合，11-肛上板），侧板（11-肛侧板），腹板（雌性：1~7正常，8以后愈合，并形成导卵器；雄性：1~8正常，9以后愈合，并形成生殖下版）】，附肢（肛须，由10或11体节的附肢变来；产卵瓣），听器，八对气门，外生殖器
三、内部结构
1、呼吸系统
气门，气囊（气门气囊，仅储藏；内脏气囊，还可交换），气管（支气管制片）
2、循环系统
心脏（八个心室，每个心室旁连有翼状肌，八对心孔，后端封闭，血液从心孔入，从前部的背大动脉流出）
3、生殖系统
悬系带——两侧附性腺——卵巢——两侧输卵管——在第七节愈合为总输卵管——通到第八节（此处还连有纳精囊，仅一个）
悬系带——精巢——输精管——射精管——阴茎（还连有贮精囊）
4、消化系统
口、咽、食道、嗉囊、砂囊（被从后发出的6对胃盲囊遮盖）、中肠（胃）、回肠、结肠、直肠
消化腺：胃盲囊，唾液腺（腺体+唾液管，在胸部）
5、排泄系统
马氏管（单细胞围成，250余条，制片），脂肪体（尿酸）
6、神经系统
脑：围咽神经、单眼神经（3）、复眼神经（2）、围食道神经
围咽神经
咽下神经（头后3，胸前3）
腹神经：胸3腹5（不包括咽下神经）
7、肌肉系统
胸部肌肉制片
Ⅴ、家蚕解剖
一、分类、检索、科
二、外形结构
体分部
头：触角一对（短小，分三节，丝/刚毛状），口器（咀嚼式，下唇由吐丝孔），外骨骼（头部有Y形蜕裂缝），单眼（6对，侧单眼）
胸：气门一对，胸足三对（分节，具爪）
腹：气门八对，腹足五对（最后一对称为臀足，不分节，具钩列，被称为伪足），雌性臀足前有四孔，雄性仅两孔
三、内部结构
1、循环系统
心脏：直管状（背/肠壁上，通过从侧部解剖可以观察到）
2、呼吸系统
气门、支气管（制片）呈现辐射状
3、消化系统（背部解剖时小心）
口、咽、食道、肠（中肠+回/结/直肠）
无消化腺，特化为丝腺
4、丝腺系统
（从前往后）口器——射丝部—分叉—输送部？——贮泌部——泌丝部
5、排泄系统
马氏管（在回肠前，两个各分三支），脂肪体（白色，不是蝗虫的黄色）
6、生殖系统
生殖芽球
7、神经系统
口球神经（很小）——一对脑神经节——咽下神经节——围食道神经——腹神经（胸5腹6）
包括脑神经节、咽下神经节、腹神经在内，一共13对神经节