DNA解链酶（解旋酶）为催化DNA螺旋解链的酶，在DNA复制、转录、修复、重组起作用。无序列特异性，大多数优先结合单链区域，少部分为双链区域，还需要结合ATP，并有ATPase活性。顺模板向不断延伸，需要Mg2+。如Dna B。