一些问题思考

1、溶液P1、P2、P3的作用分别是什么？P1中是否加入了RNase A？

2、硅基质膜为什么需要在高盐、低pH值下吸附DNA？

3、如何将线性质粒和超螺旋质粒分离？

4、质粒检测时，出现了一些超过超螺旋质粒迁移率的杂带，或者条带拖尾，分析原因

5、如何设计实验判断质粒条带中哪个是线性质粒？

6、根据实验结果，判断酶切产物的条带与质粒有何不同？

7、如果每一种酶在某质粒中只有一个酶切位点，用三种酶对质粒进行充分切割后，会检测到多少条DNA片段？

8、电泳条带出现“拖尾”的现象是为什么？

9、去蛋白液的成分可能是什么？为什么不会洗脱DNA？

10、引物设计原则

11、质粒化学转化和电转化的原则

12、质粒转化进细胞后，可采用哪些方法判断成功与否？

13、质粒酶切时，体系中加入了一定浓度的BSA，它的作用是什么？

14、利用酚/氯仿抽提质粒溶液时，离心后，氯仿处于什么位置？蛋白质处于什么位置？质粒处于什么位置？

15、PCR反应体系的基本成分有哪些？

16、PCR反应没有产物，可能原因有哪些？

17、PCR模板过量，会产生哪些影响？