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本页面主要总结生化中常见的颜色反应。

== 糖类相关颜色反应 ==

=== Bial 试验 ===
[[文件:Bial实验.png|缩略图|bial实验]]
[[文件:Bial实验2.png|缩略图|bial实验]]
苔黑酚（甲基间苯二酚/地衣酚）、浓盐酸、氯化铁。用于鉴定戊糖。

戊糖会脱水形成糠醛，再产生蓝色或绿色的产物。

己糖可能会产生浑浊棕色、黄色或灰色的溶液，很容易与戊糖的绿色区分开来。

bial实验似乎不能区分DNA和RNA。
[[文件:二苯胺.png|缩略图|二苯胺]]

=== Dische 测试 ===
二苯胺、冰醋酸、硫酸和乙醇。

加热时，DNA会产生蓝色，但RNA不产生反应。

=== Seliwanoff 检验 ===
间苯二酚和浓盐酸。
[[文件:Seliwanoff实验.png|缩略图|seliwanoff实验]]
醛糖会产生淡红色，而酮糖迅速产生鲜红色。

蔗糖也会产生鲜红色。

=== Molisch检验 ===
糖与α-萘酚乙醇溶液混合，向其上方加入一层浓硫酸，交界处产生红色环。

用于鉴定是否无糖（不只有糖会反应）的存在。

=== '''蒽酮检验''' ===
与Molisch检验原理类似，使用蒽酮和浓硫酸，在620nm有最大光吸收，可用于总糖定量。

=== Fehling试剂&Benedict试剂 ===
斐林试剂：酒石酸钾钠、氢氧化钠、硫酸铜。

本尼迪特试剂：碳酸钠、柠檬酸钠、硫酸铜。

水浴加热，还原糖可以产生砖红色沉淀。

* Barfoed实验：乙酸铜和乙酸，煮沸

=== Tollens'试剂 ===
即银氨溶液。

* Tollens’试剂有时指间苯三酚鉴定戊糖，这个检测方法与银氨溶液是同一个人发现的。

== 氨基酸相关颜色反应 ==

=== 米伦反应 ===
米伦反应（Millon reaction）被用作检测蛋白质，但实质是酪氨酸参与反应。

试剂中含有亚硝酸与硝酸，以及Hg(Ⅱ)和Hg(Ⅲ)离子，主要的显色反应是汞离子的配合过程。

[[文件:米伦反应.png|无框|384x384像素]]

可以看到被硝化后提供了配位反应的基团，因此产生颜色。

产生白色沉淀，加热后变成红色

=== <big>坂口反应</big> ===
坂口反应（Sakaguchi reaction），精氨酸的分析与测定，可用NaOH和NaCIO。

胍基与α-萘酚在碱性NaBrO中发生反应，生成红色产物。

=== Hopkins-Cole反应 ===
这个又叫乙醛酸反应（Glyoxylate reaction），反应过程涉及次溴酸根。

在蛋白溶液中加入乙醛酸，并沿试管壁慢慢注入浓硫酸，在两液层之间就会出现紫色环，凡含有吲哚基的化合物（氨基酸中的Trp）都有此反应

=== <big>茚三酮反应</big> ===
茚三酮反应（ninhydrin reaction），首先氨基酸被茚三酮氧化分解为醛、氨、CO<sub>2</sub>,弱酸下还原性茚三酮与氨和另一分子茚三酮缩合成蓝紫色物质，在570nm有吸收峰。

其中脯氨酸与羟脯氨酸与茚三酮反应生成黄色物质。

=== 黄色反应 ===
芳香族氨基酸（Tyr最为灵敏）溶液中遇到浓硝酸后，先产生白色沉淀，加热则变黄，再加碱颜色还会加深，变为橙黄色。

由于苯环被硝化，产生了硝基苯衍生物

这个反应很灵敏

有个[[:文件:黄色反应.png|图]]，可以去文件里看

== 蛋白质相关颜色反应 ==

==== '''<big>考马斯亮蓝法（Bradford反应）</big>''' ====
考马斯亮蓝:游离态呈红色(吸收峰为488nm)，利用芳香环与与蛋白质疏水区结合后呈亮蓝色(吸收峰为595nm)。
[[文件:考马斯亮蓝.png|缩略图]]
优点:反应灵敏，试剂简单，速率快，且不易被干扰。

缺点:线性关系不是很好。

有两种型号的考马斯亮蓝:R250和G250。

R250:可以被洗脱，可用于电泳条带染色。

G250:较R250多俩甲基，所以疏水性更强一些，结合迅速，常用于定量。

=== 双缩脲法 ===
当底物中含有肽键时（多肽），试液中的铜与多肽配位，配合物呈紫色，吸收峰为540nm

常用于需要快速但并不需要十分精确的测定。硫酸铵不干扰此呈色反应，使其有利于对蛋白质纯化早期步骤的测定

=== 福林酚法（Lowry法） ===
蛋白质与铜离子生成复合物后，其分子中的酪氨酸和色氨酸还原Folin-酚试剂中的磷钼酸及磷钨酸，生成蓝色化合物（钨蓝和钼蓝的混合物）。

此反应灵敏度很高，常用来测定蛋白含量，吸收峰为750nm

最早由Folin发明，后来被Lowry改进

优点：应用广泛

缺点：专一性较差，干扰物质多（如Tris缓冲剂，蔗糖，硫酸铵，巯基化物，酚类，柠檬酸等），标准曲线的直线关系不特别严格。

=== BCA法 ===
基于双缩脲原理，碱性条件下蛋白质将Cu2+还原成Cu+，BCA鳌合Cu+作为显色剂，产生蓝紫色物质，吸收峰在562nm

优点：抗干扰能力强，不易受一般浓度去污剂的干扰

缺点：可受螯合剂，高浓度还原剂的影响。

== 核酸相关颜色反应 ==

=== 福尔根反应 ===
Schiff试剂：希夫试剂（又称品红亚硫酸试剂），与醛作用而不与酮作用。

样本水解完RNA后，用1mol/L HCl，使DNA碱基与脱氧核糖之间的糖苷键&磷酯键断裂，暴露醛基，与Schiff试剂反应形成紫红色化合物

=== 甲基绿-派格宁染色法（Unna 染色法） ===
甲基绿：带两个单位正电荷，与dsDNA结合，使之呈绿色

派格宁（又称嗞罗红）：带一个单位正电荷，与RNA结合，使之呈红色

== 其他物质相关反应 ==

=== 木质素染色 ===
试剂：间苯三酚、盐酸溶液

流程：先将材料由盐酸浸透，再加间苯三酚溶液，间苯三酚与木质素反应发生樱红色。